ibidi:细胞培养、免疫荧光等细胞实验好帮手

1.一体化小室——细胞培养&显微成像两用玻片/皿 

细胞免疫荧光实验你是怎么做的?

还在用小玻片,先泡酸、再晾干、再 coating、再种细胞、染色、封片成像?

那您太 out 了吧!

使用 ibidi 产品,先养细胞、然后直接固定、染色、成像,在培养皿/玻片上全部搞定!能帮您把细胞养好、又帮您省时省力的获得漂亮的成像结果(见图 1)!

1.jpg 

图 1. 传统爬片方法与 ibidi 产品免疫荧光实验比较

2.ibidi 产品底部媲美盖玻片厚度,为高分辨率显微成像而设计的光学特性 

德国 ibidi 公司创新的μ-Slide 与μ-Dish 系列产品,与一般市面上常见的细胞培养皿不同,其底部是由独特的塑料制成,具有与玻璃材质媲美的高光学穿透与低背景荧光等特性。相较于一般细胞培养产品(图 2 左),ibidi 产品(图 2 右)底部构造厚度符合 No.1.5 标准盖玻片厚度(180 μm),用高倍镜物镜观察,可以使焦距集中在待测样本上,产生良好的成像结果。

2.jpg

图 2. ibidi 细胞培养产品底部媲美盖玻片厚度

3.ibidi 产品底部化学耐受性强,适用于多种常用的细胞固定剂(见图 3)图 3.ibidi 产品底部适用的溶剂列表 

3.jpg

4.多种多样的细胞培养表面 

细胞进行生长、发育和信号传递很大程度上取决于细胞容器的表面处理方式。ibidi 产品底部相比于普通培养皿更加平滑(见图 4)。目前,ibidi 产品μ-Slides 和μ-Dishes 有标准底、玻璃底以及多种底部预包被的产品,适用于培养不同的细胞类型,不同底之间的比较见图 5。

ibidi 标准底具有亲水超薄的特性,该底部的光学特性符合多种成像技术的要求,如相差、共聚焦和双光子显微成像。

ibiTreat,作为 ibidi 受欢迎的表面处理方式,通过了大量不同细胞系和原代细胞培养测试,且已发表的 2000 多篇使用了 ibidi 产品的期刊论文中,超过 90% 使用了 ibiTreat,表明大多数细胞在 ibiTreat 下生长良好,无需进行额外的表面处理。ibiTreat 是一种物理修饰的表面处理方式,让耗材表面亲水,利于绝大多数种类的细胞贴壁,可与其他标准细胞培养瓶和培养皿相媲美。

4.jpg

图 4. AFM(原子力显微技术)测量表面粗糙度。ibidi 产品(右下)比普通培养皿具有更平滑的底部构造,更加的成像效果。

ibidi 标准底也有疏水、无包被的表面可以选择。可以根据具体的实验需求,进行特定的包被,或者直接用来培养非贴壁细胞。

Ibidi 也有玻璃底的产品。玻璃底可以直接培养细胞,但可能需要进行表面处理来促进细胞更好的贴壁。ibidi 研发的玻璃底产品尤其适用于 TIRF、单光子及单分子应用。

5.jpg

 

图 5. ibidi 标准底与 ibidi 玻璃底 

基于以上特殊的底部构造,ibidi μ-Dish,μ-Slide 以及μ-plate 等产品都既适用于常规细胞培养,又可以简化免疫荧光实验步骤、节约实验时间,并且获得理想的显微成像效果。

ibidi μ-Dishes

ibidi μ-Dishes 产品可以进行常规的细胞培养、转染、免疫荧光实验以及高分辨率显微成像。目前 ibidi μ-Dishes 主要包括 35 mm(高壁和低壁)以及 50 mm 两种(见图 6)。50 mm 更适合于培养大量细胞,如需要收集细胞做生化实验等。35 mm 低壁的产品更适合于在显微镜下对细胞进行操作,如进行电生理膜片钳记录细胞,或者吸取单细胞进行单细胞基因组测序等实验。

6.jpg

图 6. ibidi μ-Dish 系列产品:35 mm(high wall 和 low wall),50 mm(low wall)。

ibidi μ-Dishes 另外一个精巧的设计是带锁的盖子(见图 7)。当盖子处于 lock 位置,较大程度减小蒸发的影响,因而可以在非湿润环境中进行长时程的细胞实验,如需要在培养箱外,显微镜下进行长时程的活细胞观察实验。由于 Dish 特殊的气体通透特性,在细胞培养期间气体交换(C02,O2)是并不受 lock 位置影响的。

7.jpg

图 7. 带锁的培养皿设计

μ-Slides well 系列产品:μ-Slides 2 well,4 well,8well如果您希望同时获得多个样品的显微成像结果,如比较同种细胞加入不同药物刺激的形态变化,或者实验初期用来筛选好用的抗体及摸索理想抗体浓度等实验,推荐使用μ-Slides well 系列产品(见图 8)。不同大小的开放小室适用于不同量的细胞培养。其底部也是 ibidi 标准底处理,满足细胞培养、免疫荧光实验、高分辨率显微成像的需求。

7.jpg

图 8. μ-Slides well 系列产品:μ-Slides 2 well,4 well,8well在此基础上,如果需要进行更佳的相差或者高的显微镜成像实验,如进行实时的活细胞不同位点的扫描,μ-Slides well ph+系列产品更适合您。在传统的μ-Slides well 的孔的中间,ph+产品加了一层特殊的平板(见图 9),这层平板可以有效避免开放小室中影响相差成像效果的凹液面的形成。在这层平板与 well 的四周有缝隙,方便向其中加入细胞及换液等操作。

8.jpg

图 9. μ-Slides well 与 μ-Slides well ph+ 产品以及成像对比图。A,产品对比图,ph+在中间有特殊的平板,四周有孔洞,方便铺细胞及换液等操作。B,ph+有效防止凹液面形成(右侧),整个视野都有良好的相差成像效果。

带网格(Grid)的 Dish、well 产品

以上产品还有底部带网格的(见图 10),如 35 mm Dish Grid-500,μ-Slides 8 well Grid-500。可应用于细胞及细胞团的重定位,特定区域发生事件的数目如细胞转染效率的统计,细胞运动距离的参考,对单个细胞进行显微注射或者追踪轴突的生长等。同样这些产品具备 ibidi 标准底设计,适用于高分辨率的显微成像。

10.jpg

 

图 10. 带网格产品的底部网格图示

μ-Slide channel 系列产品

一体化小室产品还包括μ-Slide channel 系列产品(图 11A),这类产品有通道式的细胞培养空间,同样具有 ibidi 标准底,适合于高分辨率显微成像。产品两端有鲁尔接头,可应用于流体剪切力实验,即在培养基流动状态下就行细胞培养。在开放小室中铺细胞时,通常依赖于人为晃动操作,对于新手尤其容易使细胞聚团,导致细胞分布不均(图 11C)。而通道式的设计,巧妙回避这一问题,只需要向通道中加入细胞悬液,无需晃动(图 11B),轻松使细胞在通道中均匀分布(图 11D)。另外当需要进行准确的少量试剂换液时,或者试剂、抗体珍贵,μ-Slide channel 系列产品将是理想选择。

11.jpg

图 11. μ-Slide channel 系列产品。A,μ-Slide I 及μ-Slide IV 产品图示。B,μ-Slide I 为例说明系列产品适用步骤,向通道中加入 100 ul 细胞悬液,向一侧储液池中加入无细胞的培养液,向另一侧储液池中加入无细胞的培养液,置于培养箱中培养。C,开放小室的细胞分布,依赖于晃动操作,经常会分布不均匀。D,channel 中细胞的分布,由于其独特的集合设计,使细胞非常容易的均匀分布在通道中。

Removable & Sticky 系列产品

考虑到有些用户希望保存标本,ibidi 公司还开发了 removable 的硅胶培养室(图 12A),用于细胞培养和显微成像。将硅胶材料移除后,可以封片进行保存。

另外,ibidi 公司还开发了 Sticky 的 well 及通道(图 12B-D)。这类产品通用性强,可与多种多样的底部材料粘贴。而且对于不易放入通道培养的细胞、组织等,可以选择先放在底部材料上,再将培养通道粘贴到其上进行实验。

12.jpg

图 12. Removable & Sticky 系列产品。A,12 well Chamber, removable。B,sticky-Slide I Luer。C,sticky-Slide 8 well。D,sticky-Slide VI 0.4。
 

易必迪 ibidi 公司专注于细胞培养及功能实验的耗材及仪器开发,产品设计巧妙,适用于各种各样的实验需求,简化实验步骤,节约实验时间。如果您也在培养细胞,也在做细胞免疫荧光实验,也在做细胞功能实验,那么快来试试 ibidi 系列产品吧,让您实验变得轻松简单,事半功倍!

ICP备案号:沪ICP备15057650号-1 © Copyright 2015 雷萌生物科技(上海)有限公司 保留所有版权.

首页   |   产品中心   |   产品应用   |   技术支持   |   新闻中心   |   关于我们   |   ibidi官网