1.介绍

　　本应用逐步说明了如何串联连接多个Luer-Slides。优点是仅使用一个流体单元即可观察和培养多个载玻片。当使用相同规格的载玻片时，载玻片中的流速是相同的。也可以通过连接不同高度的载玻片来改变剪切速率（例如，µ-Slide I0.2Luer和µ-Slide I0.4Luer）。

　　本次介绍了两个载玻片连接的过程。但是它可以应用于大量的载玻片。

　　2.材料

　　载玻片：2片 µ-Slides I 0.6Luer, ibiTreat                ibidi (80186)

　　细胞：Endothelial cells (2.5 · 105 per slide)          e.g. Promocell

　　培养基：Endothelial Cell Growth Medium            e.g. Promocell

　　连接器：Serial Connector                                      ibidi (10830)

　　注射器：带简单Luer适配器的无菌注射器（5 ml）

　　串行连接器：

　　管道：Silicone Tubing 1.6 mm ID                           ibidi (10842)

　　适配器：Luer Connector Male                                 ibidi (10824)

　　将一个塑料连接器插入通道载玻片的两端（6厘米），以在载玻片之间连接起来。下图是在两端带有两个配套的Luer公接头的连接器管。可用乙醇或高压灭菌消毒接头。

　　必须在无菌条件下执行以下步骤！

　　3. 播种细胞

　　· 准备1.67 · 106 cells/ml.的细胞悬液。

　　· 将150 µl注入通道。仅填充通道体积（图1a）。

　　· 将帽盖在Luer接头上，并将载玻片放在培养箱中培养半小时来固定细胞。

　　· 细胞固定后，将两边储液接口各加60 µl充满。

　　4. 连接载玻片

　　现在准备载玻片，使细胞在通道中生长，并向储液池中填充60 µl无细胞培养基（请参见第3节）。

　　· 在连接之前，将所有储液器各加60 µl（图1b）。

　　· 将连接器管的一个Luer适配器插入载玻片的一个母Luer适配器中（图1c）。

　　· 将一些预备的培养基吸入注射器。倒转注射器并将多余的空气推出（图1d）。

　　· 使用没有气泡的注射器在载玻片端口注入。可能会有些溢出（图1e）。

　　小心地将液体注入载玻片，直到连接器管中充满为止（图1f）

　　图1：（a）接种细胞时的用量； （b）载玻片在连接之前已完全填满； （c）载玻片中插入连接管； （d）无气泡的注射器； （e）将注射器插入载玻片一端； （f）用注射器推动介质来填充连接器管道

　　· 当连接器管道完全充满时（图2a），将其插入第二张载玻片的接口上（图2b-d）。

　　· 如果要连接两个以上的载玻片，将第二个连接器管放在第二个载玻片空的另一端口上，用注射器推入介质，依此类推。

　　· 慢慢连接的所有载玻片将注射器从适配器上卸下（图2e）。

　　· 要将载玻片连接到灌注套件，两个Luer容器必须在顶部填充培养基。可用纸巾擦去过多的培养基。

　　图2：（a）连接管已完全充满； （b-c）将连接器管插入第二载玻片的鲁尔接头上； （d）带有适配接头管连接； （e）取下注射器； （f）擦去溢出的介质，并填充储液罐以连接到灌注套件。

　　5. 连接到灌注装置

　　将载玻片连接到灌注套件

　　图片串联安装带有两个µ-Slides I Luer的一个流体单元