样品制备

　　步骤

　　ibidi伤口愈合/划痕实验的伤口间隙是通过使用ibidi Culture-Inserts插件产生的，由于确定的无细胞间隙的大小，这保证了极高的再现性。在合适的细胞培养容器中选择合适的插件。接种和培养细胞，直到它们形成光学融合的单层。让细胞生长大约24小时。如有必要，用增殖抑制剂处理细胞，然后移除插件以产生间隙。

　　ibidi解决方案

　　ibidi开发的伤口愈合产品，设计精巧，操作简单，标准化的数据分析方法恰恰弥补了传统实验方法的不足。ibidi设计了一种双孔的硅胶插件，可以放在培养皿或孔板中，插件两孔间的孔壁宽度为500μm。将细胞种在插件中，等待细胞贴壁长满后，将插件移除，这样，两孔间的缝隙就是一个无细胞的“划痕”。由于是制式的插件，所以两孔间的缝隙宽度是均一的500μm。整个实验步骤非常简单。

　　结果简单明了，重复性好，高质量的底部材质，使得成像效果极佳。配套ibidi伤口愈合分析软件，几分钟就能得到测量结果。

　　ibidi Culture-Insert 2孔 /3孔 / 4孔插件可用于伤口愈合、迁移、2D侵袭测定和细胞的共培养的，具有无细胞确定间隙的硅胶插件。ibidi有25个/盒的单独插件（实验人员可自行插入实验容器中），也有将插件预置在µ-Dish 35mm培养皿中的，为您提供快速而简单的实验设置。

　　Culture-Inserts 插件中最小和标准的伤口尺寸是 500 µm。 Culture-Insert 4 Well /4孔插件会有一个额外的中心间隙，伤口大小为 1000 µm。

　　即用型ibidi Culture-Insert 2 Well 24预置2孔插件的24孔板，可用于经济高效的高通量测定。

　　ibidi µ-Slide 2 Well 2孔腔室载玻片含2个具有理想尺寸的孔，可用于插入插件。

　　活细胞成像

　　步骤

　　在大多数情况下，应在间隙产生后立即使用相差显微镜对细胞进行监测。可以在不同的时间点拍摄间隙的照片（例如，在6和12小时之后）或进行活细胞成像。通常，监测细胞24小时或更短时间就足够了。为了进行准确的分析，在整个实验过程中观察完全相同的间隙位置是很重要的。

　　ibidi的解决方案

　　 ibidi Stage Top Incubation System孵育系统在显微镜下提供生理环境，能够在伤口愈合检测和迁移检测过程中对活细胞进行成像。

　　数据分析

　　步骤

　　典型的伤口愈合和迁移实验产生千兆字节的成像数据，这些数据必须通过手动图像分析或使用自动化软件进行进一步处理和分析。在许多实验装置中，主要的读数是伤口闭合的速度。其他可能的读数是无细胞区域和细胞覆盖区域的测量值。

　　ibidi的解决方案

　　通过Wound Healing FastTrack AI Image Analysis伤口愈合快速跟踪人工智能图像分析软件，ibidi为伤口愈合和迁移分析的定量提供了一个省时、全自动的解决方案。它包括对无细胞区域、细胞覆盖区域和伤口愈合速度的分析。